PCR(Polymerase Chain Reaction:ポリメラーゼ連鎖反応)


ある特定の遺伝子を何百万倍にも増幅する事ができる技術。
それは、病気の診断、遺伝子の同定、遺伝子鑑識技術etc…に利用。

キャリー・マリス博士(1993年ノーベル化学賞)の研究によって開発。

操作方法:
少量の二本鎖DNA液にその遺伝子の両端末に相補的な短い合成一本鎖DNA(プライマー)を大量に入れる。
タンパク質は熱に対して安定しないため、高温で変性してしまう。よって温泉菌のDNA複製酵素を使う。
95℃に温める。
二本鎖DNAが熱によって解かれ一本鎖になる。
次に65℃~70℃くらいまで冷ます。
ほどけたDNAが短い合成DNAと水素結合し、
部分的に二本鎖を組む。

DNA複製酵素:部分的な二本鎖DNAを完全な二本鎖DNAに複製する酵素。

DNAの複製に成功。
再度、95℃に熱し一本鎖にします。
そして、65℃~70℃に冷ます。
プライマーDNAは大量に入っているので、別のプライマーDNAと部分的な二本鎖を組む。
DNA複製酵素がプライマーDNAを伸ばし、4倍となる。
この過程を何度も繰り返しことで2つのプライマーに挟まれたDNA部分が増幅される。
30回繰り返せば、230倍。10億倍に変化する。


温度の上げ下げで目的のDNAが増幅される。
接合点の部分を増幅させるようなプライマーを使えば、さらに感度がよいとされる。

結果が原因となり、熱を上げ下げした産物は鋳型となり、さらに産物の数を増やす。

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